Absorbance microplate reader

pokud jste na trhu pro novou čtečku absorbance microplate reader, existuje několik faktorů, které je třeba vzít v úvahu, protože výkon přístroje může významně ovlivnit kvalitu vašich výzkumných údajů.

volba vlnové délky
Schopnost výběru vlnové délky je povinná pro čtečku absorpčních mikrodestiček a závisí na typu použitých detektorů.

běžně se používají dva různé typy detektorů: Fotonásobiče (PMTs) nebo spektrometry CCD (Charge Coupled Device).

čtečka MIKRODESTIČEK na bázi PMT vyžaduje nástroj pro výběr vlnové délky mezi zdrojem světla a vzorkem. Optické filtry nebo monochromátory volí požadovanou vlnovou délku před odesláním světla do vzorku. Tímto způsobem se vzorkem přenáší pouze světlo s požadovanou vlnovou délkou, dosáhne PMT a je kvantifikováno.

pro skenování spekter nebo rozsahu vlnových délek vyžaduje čtečka mikroplatek na bázi PMT monochromátor. To vybírá požadované vlnové délky a měří je postupně při mechanickém pohybu. Pro měření více diskrétních vlnových délek je vyžadováno více jednoduchých měření s různými filtry nebo monochromatickým skenováním.

čtečka mikrodestiček na bázi CCD spektrometru nevyžaduje nástroj pro výběr vlnové délky. Spektrometr odděluje různé vlnové délky přítomné ve světle přenášeném vzorkem, protože jsou nasměrovány na detektor CCD. To zachycuje intenzitu všech vlnových délek najednou. Tímto způsobem lze v krátkém čase získat spektra, jednu nebo více diskrétních vlnových délek.

pokud vaše aplikace potřebuje spektrální snímání, CCD spektrometry jsou výrazně rychlejší než monochromátory, protože mechanické spektrální skenování není nutné.

přístroje BMG LABTECH jsou vybaveny UV / VIS spektrometrem pro měření absorbance. To zachycuje celé spektrum rozsahu od 220 do 1000 nm za méně než sekundu / jamku.

kompatibilní formáty mikrodestiček
běžně se v aplikacích vědy o životě měří základní absorpční testy, jako je ELISA, v 96 jamkových mikrodestičkách. Pokud však máte více vzorků a / nebo chcete ušetřit drahocenná činidla nebo čas, lze také použít formáty 384 a 1536 jamek. Jen se ujistěte, že vaše čtečka microplate absorbance je také schopna číst formát microplate, který plánujete používat.

třepání a inkubace
při hledání čtečky absorpčních mikrodestiček byste měli zvážit povahu svého výzkumu a test, který chcete spustit. Obecně jsou třepání a inkubace dvěma důležitými rysy. Inkubace je kriticky důležitá při provádění enzymatických testů při stabilních teplotách, např. 37° C. více možností třepání umožňuje správné promíchání vzorků. Pro aplikace, jako jsou testy růstu buněk v bakteriích nebo kvasinkách (OD600), je třepání rozhodující pro dobrou okysličení a následnou rychlou replikaci buněk.

kompatibilita s kyvetami
tradičně byla měření absorbance prováděna v kyvetách s normalizovanou délkou dráhy 1 cm. V mikrodestičkách se délka cesty mění v závislosti na objemu a formátu desky. Pokud se měří vodné roztoky, může být měření mikrodestičky normalizováno pomocí korekce délky dráhy voda-pík. Pokud i přes tuto možnost, pro váš výzkum stále občas vyžadujete měření vzorků v kyvetách, ujistěte se, že zvolená čtečka mikrodestiček má buď integrovaný kyvetový port, jako je SPECTROstar Nano, nebo deskové adaptéry pro měření kyvet vodorovně jako deska LVis.

Software pro redukci dat
Obecně platí, že software, který spouští čtečku mikroplatek, je velmi podceňovanou součástí balíčku. Pro některé čtenáře, software řídí pouze proces měření a poskytuje surový datový výstup. V ostatních případech může provádět komplexní analýzu dat.

komplexní, snadno použitelný a flexibilní software může usnadnit život, zjednodušit detekci a analýzu dat, abyste mohli ze svého nástroje vytěžit maximum.

mezi nejužitečnější funkce výpočtu patří automatické odčítání prázdných vzorků, automatický výpočet koncentrací vzorků na základě standardních křivek pro testy ELISA nebo na beer-Lambertově zákoně, poměry 260/280, korekce délky dráhy a enzymatické konstanty, jako jsou Km a Vmax.

na softwarovém balíčku BMG LABTECH mají nejběžnější testy předdefinované protokoly specifické pro rychlý běh a vyhrazené šablony pro redukci dat. Prostřednictvím těchto specializovaných řešení, sběr dat a analýza se provádí jediným kliknutím myši, což vědcům umožňuje provádět experimenty rychle a snadno.