Absorbance microplate reader

hvis du er på markedet for en ny absorbance microplate reader, er der et par faktorer, der skal tages i betragtning, da instrumentets ydeevne kan påvirke kvaliteten af dine forskningsdata væsentligt.

valg af bølgelængde
en Valg af bølgelængde er obligatorisk for en absorbansmikropladelæser og afhænger af den type detektorer, der bruges.

to forskellige typer detektorer anvendes almindeligvis: Fotomultiplikatorrør (PMT ‘ er) eller ladekoblet enhed (CCD) spektrometre.

den PMT-baserede mikropladelæser kræver et værktøj til valg af bølgelængde mellem lyskilde og prøve. Optiske filtre eller monokromatorer vælger den ønskede bølgelængde, før lyset sendes til prøven. På denne måde transmitteres kun lyset ved en ønsket bølgelængde gennem prøven, når PMT og kvantificeres.

for at scanne spektre eller en række bølgelængder kræver den PMT-baserede mikropladelæser en monokromator. Dette vælger de ønskede bølgelængder og måler dem sekventielt ved mekanisk bevægelse. Til målinger af flere diskrete bølgelængder kræves flere enkeltmålinger med forskellige filtre eller en monokromatorscanning.

den CCD-spektrometerbaserede mikropladelæser kræver ikke et værktøj til valg af bølgelængde. Spektrometeret adskiller de forskellige bølgelængder, der er til stede i det lys, der transmitteres gennem prøven, da disse er rettet mod CCD-detektoren. Dette fanger intensiteten af alle bølgelængder på en gang. På denne måde kan spektre, enkelt eller flere diskrete bølgelængder erhverves på kort tid.

hvis din applikation har brug for spektral erhvervelse, er CCD-spektrometre betydeligt hurtigere end monokromatorer, da mekanisk spektral scanning ikke er påkrævet.

BMG LABTECH-instrumenter er udstyret med et UV/vis-spektrometer til absorbansmålinger. Dette fanger et komplet spektrum fra 220 til 1000 nm på mindre end et sekund/brønd.

kompatible mikropladeformater
almindeligt i Biovidenskabelige applikationer måles grundlæggende absorbansanalyser som ELISA i 96 brøndmikroplader. Men hvis du har flere prøver og/eller ønsker at spare dyrebare reagenser eller tid, kan 384 og 1536 brøndformater også bruges. Bare sørg for, at din absorbans mikropladelæser efter eget valg også er i stand til at læse det mikropladeformat, du planlægger at bruge.

rystning og inkubation
når du leder efter en absorbansmikropladelæser, skal du overveje arten af din forskning og det assay, du vil køre. Generelt er rystelse og inkubation to vigtige træk. Inkubation er kritisk vigtig, når der udføres assays ved stabile temperaturer, f.eks. 37 liter C. flere rystemuligheder muliggør en korrekt blanding af prøverne. Til applikationer som cellevækstanalyser i bakterier eller gær (OD600) er rystning afgørende for en god iltning og deraf følgende hurtig cellereplikation.

kompatibilitet med kuvetter
traditionelt blev absorbansmålinger udført i kuvetter med en normaliseret banelængde på 1 cm. I mikroplader ændres Stiens længde afhængigt af volumen og pladeformat. Hvis vandige opløsninger måles, kan mikroplademålingen normaliseres ved hjælp af korrektion af vandspidslængde. Hvis på trods af denne mulighed, til din forskning har du stadig lejlighedsvis brug for måling af prøver i kuvetter, sørg for, at den valgte mikropladelæser enten har en integreret kuvetteport som SPECTROstar Nano, eller pladeadaptere til måling af kuvetter vandret som LVis-pladen.

program til datareduktion
generelt er det program, der kører mikropladelæseren, en meget undervurderet del af pakken. For nogle læsere styrer programmet kun måleprocessen og giver en rå dataudgang. I andre tilfælde kan den udføre kompleks dataanalyse.

et omfattende, brugervenligt og fleksibelt program kan gøre livet lettere, forenkle detektion og dataanalyse, så du kan få mest muligt ud af dit instrument.

de mest nyttige beregningsfunktioner inkluderer automatisk tom subtraktion, automatisk beregning af prøvekoncentrationer baseret på standardkurver for ELISA-analyser eller på Beer-Lambert-loven, 260/280 forhold, korrektioner af stilængde og konstanter som f.eks.

på BMG LABTECH-programpakken har de mest almindelige analyser foruddefinerede hurtige analysespecifikke protokoller og dedikerede datareduktionsskabeloner. Gennem disse dedikerede løsninger udføres dataindsamling og analyse med et enkelt museklik, der gør det muligt for forskere at udføre eksperimenter hurtigt og nemt.