Absorbance microplate reader

jos olet markkinoilla uuden absorbance microplate Readerin suhteen, on otettava huomioon muutama seikka, sillä laitteen suorituskyky voi vaikuttaa merkittävästi tutkimustiedon laatuun.

aallonpituuden valinta
aallonpituuden valintakyky on pakollinen absorbanssimikrotelevyn lukijalle ja riippuu käytettävien ilmaisimien tyypistä.

käytetään yleisesti kahta erityyppistä ilmaisinta: Valomonistinputket (PMTS) tai Varauskytketyt CCD-spektrometrit.

PMT-pohjainen mikrotiitterinlukija vaatii aallonpituuden valintatyökalun valonlähteen ja näytteen välillä. Optiset suodattimet tai monokromaattorit valitsevat halutun aallonpituuden ennen kuin valo lähetetään näytteeseen. Näin vain halutulla aallonpituudella oleva valo siirtyy näytteen läpi, saavuttaa PMT: n ja kvantifioidaan.

spektrien tai tietyn aallonpituusalueen skannaamiseen PMT-pohjainen mikrotiitterinlukija vaatii monokromaattorin. Tämä valitsee halutut aallonpituudet ja mittaa ne peräkkäin mekaanisen liikkeen mukaan. Useiden erillisten aallonpituuksien mittauksiin tarvitaan useita yksittäisiä mittauksia eri suodattimilla tai monokromaattinen skannaus.

CCD-spektrometriin perustuva mikrotiitterinlukija ei vaadi aallonpituuden valintatyökalua. Spektrometri erottaa näytteen läpi lähetetyn valon eri aallonpituudet, koska ne ohjataan CCD-ilmaisimeen. Tämä kuvaa kaikkien aallonpituuksien voimakkuutta kerralla. Näin spektrejä, yksittäisiä tai useita diskreettejä aallonpituuksia voidaan hankkia lyhyessä ajassa.

jos sovelluksesi tarvitsee spektrin hankintaa, CCD-spektrometrit ovat huomattavasti nopeampia kuin monokromaattorit, koska mekaanista spektriskannausta ei tarvita.

BMG LABTECH-instrumentit on varustettu UV/vis-spektrometrillä absorbanssimittauksia varten. Tämä kaappaa täyden spektrin 220-1000 nm alle sekunnissa / kaivo.

yhteensopivat mikrotiitterimuodot
yleisesti life science-sovelluksissa ELISA: n kaltaiset perusabsorbanssimääritykset mitataan 96 kuoppamikroplaatissa. Kuitenkin, jos sinulla on useita näytteitä ja / tai haluat säästää arvokkaita reagensseja tai aikaa, 384 ja 1536 hyvin formaatteja voidaan käyttää. Varmista vain, että valitsemasi absorbance microplate reader pystyy myös lukemaan mikroplate-formaatin, jota aiot käyttää.

ravistaminen ja inkubointi
kun etsit absorbanssimikrotelevyn lukijaa, sinun on otettava huomioon tutkimuksesi luonne ja määritys, jonka haluat suorittaa. Yleensä ravistelu ja haudonta ovat kaksi tärkeää ominaisuutta. Inkubaatio on ratkaisevan tärkeää, kun suoritetaan entsymaattisia määrityksiä stabiilissa lämpötilassa (esim.37° C). useat ravistusvaihtoehdot mahdollistavat näytteiden asianmukaisen sekoittamisen. Sovelluksissa, kuten solukasvutesteissä bakteereissa tai hiivassa (OD600), ravistaminen on ratkaisevan tärkeää hyvän hapetuksen ja siitä seuraavan nopean solujen replikaation kannalta.

Yhteensopivuus kuvettien kanssa
perinteisesti absorbanssimittaukset on tehty kuveteilla, joiden normalisoitu reitin pituus on 1 cm. Mikromuoveissa polun pituus muuttuu tilavuudesta ja levymuodosta riippuen. Jos vesiliuoksia mitataan, mikrotiitterin mittaus voidaan normalisoida veden ja piikin välisen reitin pituuden korjauksen avulla. Jos tästä vaihtoehdosta huolimatta tarvitset tutkimuksiasi varten vielä toisinaan mittanäytteitä kuvetteina, varmista, että valitussa mikrotiitterinlukijassa on joko integroitu cuvette-portti, kuten SPECTROstar Nano, tai levysovitukset, joilla voit mitata kuvetteja vaakatasossa, kuten LVIS-levy.

tiedon vähentämiseen tarkoitettu ohjelmisto
yleensä mikrotiitterinlukijaa pyörittävä ohjelmisto on hyvin aliarvioitu osa pakettia. Joillekin lukijoille ohjelmisto ohjaa vain mittausprosessia ja tarjoaa raakadatan ulostulon. Muissa tapauksissa se voi suorittaa monimutkaisia tietojen analysointia.

kattava, helppokäyttöinen ja joustava ohjelmisto voi helpottaa elämää, yksinkertaistaa havaitsemista ja tietojen analysointia, jotta voit saada kaiken irti instrumentistasi.

hyödyllisimpiä laskentaominaisuuksia ovat automaattinen nollan vähennyslasku, Elisa-määritysten standardikäyriin tai Beer-Lambertin lakiin perustuva näytteen pitoisuuksien automaattinen laskeminen, 260/280-suhde, polun pituuden korjaukset sekä entsymaattiset vakiot, kuten Km ja Vmax.

BMG LABTECH-ohjelmistopaketissa yleisimmät määritykset ovat ennalta määritettyjä quick-run-määritysprotokollia ja erityisiä tietojen vähentämismalleja. Näiden erityisten ratkaisujen avulla tiedonhankinta ja analysointi suoritetaan yhdellä hiiren napsautuksella, mikä mahdollistaa tutkijoiden suorittaa kokeita nopeasti ja helposti.