Lecteur de microplaques d’absorbance

Si vous êtes sur le marché pour un nouveau lecteur de microplaques d’absorbance, il y a quelques facteurs à prendre en compte, car les performances de l’instrument peuvent affecter de manière significative la qualité de vos données de recherche.

Sélection de longueur d’onde
Une capacité de sélection de longueur d’onde est obligatoire pour un lecteur de microplaques à absorbance et dépend du type de détecteurs utilisés.

Deux types de détecteurs différents sont couramment utilisés: Tubes photomultiplicateurs (PMT) ou spectromètres à Dispositif à couplage de Charge (CCD).

Le lecteur de microplaques à base de PMT nécessite un outil de sélection de longueur d’onde entre la source lumineuse et l’échantillon. Les filtres optiques ou les monochromateurs sélectionnent la longueur d’onde souhaitée avant que la lumière ne soit envoyée à l’échantillon. De cette façon, seule la lumière à une longueur d’onde désirée est transmise à travers l’échantillon, atteint la PMT et est quantifiée.

Pour scanner des spectres ou une gamme de longueurs d’onde, le lecteur de microplaques à base de PMT nécessite un monochromateur. Ceci sélectionne les longueurs d’onde souhaitées et les mesure séquentiellement lors d’un mouvement mécanique. Pour les mesures de plusieurs longueurs d’onde discrètes, plusieurs mesures simples avec différents filtres ou un balayage monochromateur sont nécessaires.

Le lecteur de microplaques à base de spectromètre CCD ne nécessite pas d’outil de sélection de longueur d’onde. Le spectromètre sépare les différentes longueurs d’onde présentes dans la lumière transmise à travers l’échantillon au fur et à mesure que celles-ci sont dirigées sur le détecteur CCD. Cela capture l’intensité de toutes les longueurs d’onde à la fois. De cette façon, des spectres, des longueurs d’onde discrètes simples ou multiples peuvent être acquis en peu de temps.

Si votre application nécessite une acquisition spectrale, les spectromètres CCD sont nettement plus rapides que les monochromateurs, car un balayage spectral mécanique n’est pas nécessaire.

Les instruments BMG LABTECH sont équipés d’un spectromètre UV/vis pour les mesures d’absorbance. Cela capture un spectre complet de 220 à 1000 nm en moins d’une seconde / puits.

Formats de microplaques compatibles
Généralement dans les applications des sciences de la vie, les tests d’absorbance de base comme ELISA sont mesurés dans des microplaques à 96 puits. Cependant, si vous avez plusieurs échantillons et / ou souhaitez économiser de précieux réactifs ou du temps, les formats 384 et 1536 puits peuvent également être utilisés. Assurez-vous simplement que votre lecteur de microplaques absorbance de choix est également capable de lire le format de microplaques que vous prévoyez d’utiliser.

Agitation et incubation
Lorsque vous recherchez un lecteur de microplaques à absorbance, vous devez tenir compte de la nature de votre recherche et de l’essai que vous souhaitez exécuter. Généralement, l’agitation et l’incubation sont deux caractéristiques importantes. L’incubation est d’une importance critique lors de tests enzymatiques à des températures stables, par exemple 37 ° C. Plusieurs options d’agitation permettent un mélange correct des échantillons. Pour des applications telles que les tests de croissance cellulaire chez les bactéries ou les levures (OD600), l’agitation est cruciale pour une bonne oxygénation et une réplication cellulaire rapide.

Compatibilité avec les cuvettes
Traditionnellement, les mesures d’absorbance étaient effectuées dans des cuvettes avec une longueur de trajet normalisée de 1 cm. Dans les microplaques, la longueur du chemin change en fonction du volume et du format de la plaque. Si des solutions aqueuses sont mesurées, la mesure de la microplaque peut être normalisée en utilisant la correction de longueur de trajet eau-crête. Si malgré cette option, pour vos recherches, vous avez encore parfois besoin de mesurer des échantillons dans des cuvettes, assurez-vous que le lecteur de microplaques de votre choix dispose soit d’un port de cuvette intégré comme le SPECTROstar Nano, soit d’adaptateurs de plaque pour mesurer les cuvettes horizontalement comme la plaque LVis.

Logiciel de réduction des données
Généralement, le logiciel qui exécute le lecteur de microplaques est une partie très sous-estimée du package. Pour certains lecteurs, le logiciel ne contrôle que le processus de mesure et fournit une sortie de données brutes. Dans d’autres cas, il peut effectuer une analyse de données complexe.

Un logiciel complet, facile à utiliser et flexible peut vous faciliter la vie, simplifier la détection et l’analyse des données afin que vous puissiez tirer le meilleur parti de votre instrument.

Les fonctions de calcul les plus utiles comprennent la soustraction automatique des blancs, le calcul automatique des concentrations d’échantillons sur la base de courbes standard pour les tests ELISA ou de la loi de Beer-Lambert, les rapports 260/280, les corrections de longueur de trajet et les constantes enzymatiques telles que Km et Vmax.

Sur le progiciel BMG LABTECH, les tests les plus courants ont des protocoles prédéfinis spécifiques aux tests à exécution rapide et des modèles de réduction de données dédiés. Grâce à ces solutions dédiées, l’acquisition et l’analyse des données s’effectuent d’un simple clic de souris, permettant aux chercheurs de réaliser des expériences rapidement et facilement.