Absorbance microplate reader

ha új absorbance microplate reader piacon van, néhány tényezőt figyelembe kell venni, mivel a műszer teljesítménye jelentősen befolyásolhatja a kutatási adatok minőségét.

hullámhossz-kiválasztás
az abszorbancia mikrolemez-olvasó számára a hullámhossz-kiválasztási képesség kötelező, és az alkalmazott detektorok típusától függ.

két különböző típusú detektort használnak általában: Fényszorzó csövek (PMT-k) vagy Töltéscsatolt eszköz (CCD) spektrométerek.

a PMT-alapú mikrolemez-olvasó hullámhossz-választó eszközt igényel a fényforrás és a minta között. Az optikai szűrők vagy monokromátorok kiválasztják a kívánt hullámhosszt, mielőtt a fényt a mintába küldenék. Ily módon csak a kívánt hullámhosszúságú fényt továbbítják a mintán keresztül, eléri a PMT-t, és számszerűsítik.

spektrumok vagy hullámhossz-tartományok letapogatásához a PMT-alapú mikrolemez-olvasó monokromátort igényel. Ez kiválasztja a kívánt hullámhosszakat, és mechanikai mozgáskor egymás után méri őket. Több diszkrét hullámhossz méréséhez több egyedi mérésre van szükség különböző szűrőkkel vagy monokromátoros letapogatással.

a CCD-spektrométer alapú mikrolemez-olvasó nem igényel hullámhossz-kiválasztó eszközt. A spektrométer elválasztja a mintán keresztül továbbított fény különböző hullámhosszait, mivel ezek a CCD detektorra irányulnak. Ez egyszerre rögzíti az összes hullámhossz intenzitását. Ily módon spektrumok, egy vagy több diszkrét hullámhossz rövid idő alatt megszerezhető.

ha alkalmazásának spektrális felvételre van szüksége, a CCD spektrométerek lényegesen gyorsabbak, mint a monokromátorok, mivel nincs szükség mechanikus spektrális szkennelésre.

a BMG LABTECH műszerek UV/vis spektrométerrel vannak felszerelve az abszorbancia mérésére. Ez 220-1000 nm teljes tartományú spektrumot rögzít kevesebb, mint egy másodperc/kút alatt.

kompatibilis mikrolemez formátumok
az élettudományi alkalmazásokban általában az alapvető abszorbancia-vizsgálatokat, például az ELISA-t 96 jól mikrolemezben mérik. Ha azonban több mintával rendelkezik és / vagy értékes reagenseket vagy időt szeretne megtakarítani, akkor a 384 és 1536 kútformátumok is használhatók. Csak győződjön meg arról, hogy a választott abszorbancia mikrolemez-olvasó képes-e olvasni a használni kívánt mikrolemez-formátumot is.

Rázás és inkubálás
amikor abszorbancia mikrolemez-olvasót keres, figyelembe kell vennie a kutatás és a futtatni kívánt vizsgálat jellegét. Általában a rázás és az inkubáció két fontos jellemző. Az inkubáció kritikus fontosságú, ha stabil hőmérsékleten, pl. 37 .. C. A többszörös rázási lehetőségek lehetővé teszik a minták megfelelő keverését. Az olyan alkalmazásoknál, mint a sejtnövekedési vizsgálatok baktériumokban vagy élesztőben (OD600), a rázás elengedhetetlen a jó oxigénellátáshoz és ennek következtében a sejtek gyors replikációjához.

Kompatibilitás küvettákkal
hagyományosan az abszorbancia méréseket 1 cm normalizált úthosszúságú küvettákban végezték. A mikrolemezekben az útvonal hossza a térfogattól és a lemezformátumtól függően változik. Vizes oldatok mérése esetén a mikrolemez mérése normalizálható a víz-csúcs úthossz korrekció alkalmazásával. Ha ennek a lehetőségnek a ellenére, kutatásához továbbra is alkalmanként küvettákban kell mérnie a mintákat, győződjön meg arról, hogy a választott mikrolemez-olvasónak van-e integrált küvettaportja, mint például a SPECTROstar Nano, vagy lemezadapterek a küvetták vízszintes mérésére, mint az LVis lemez.

adatcsökkentési szoftver
általában a mikrolemez-olvasót futtató szoftver nagyon alábecsült része a csomagnak. Néhány olvasó számára a szoftver csak a mérési folyamatot vezérli, és nyers adatkimenetet biztosít. Más esetekben komplex adatelemzést végezhet.

egy átfogó, könnyen használható és rugalmas szoftver megkönnyítheti az életet, egyszerűsítheti az észlelést és az adatelemzést, így a legtöbbet hozhatja ki eszközéből.

a leghasznosabb számítási funkciók közé tartozik az automatikus vakkivonás, a mintakoncentrációk automatikus kiszámítása az ELISA-vizsgálatok standard görbéi vagy a Beer-Lambert-törvény alapján, 260/280 arányok, úthossz-korrekciók és enzimatikus állandók, például Km és Vmax.

a BMG LABTECH szoftvercsomagban a leggyakoribb vizsgálatok előre meghatározott gyors futtatású vizsgálatspecifikus protokollokkal és dedikált adatcsökkentési sablonokkal rendelkeznek. Ezeken a dedikált megoldásokon keresztül az adatgyűjtés és az elemzés egyetlen egérkattintással történik, lehetővé téve a kutatók számára, hogy gyorsan és egyszerűen végezzenek kísérleteket.