Ordinamento delle celle: cos’è l’ordinamento delle celle? Tecniche e approcci all’ordinamento delle celle

Se stai leggendo questo, probabilmente hai già capito o almeno hai una buona idea di cosa sia l’ordinamento delle celle e la separazione delle celle. Tuttavia, saresti sorpreso da quante volte ci vengono poste domande come: “Qual è la differenza tra l’ordinamento delle cellule e la separazione delle cellule?”

Riceviamo anche domande come: “Quali sono i diversi modi per separare le cellule?”o” Qual è la differenza tra separazione cellulare positiva e negativa?”

Per rispondere a queste domande, abbiamo messo insieme un riassunto di seguito. Nella nostra esperienza, la separazione cellulare consiste nell’isolare una popolazione cellulare da altre cellule o campioni biologici.

Quali sono i diversi approcci di separazione cellulare?

Esistono tre diversi approcci di separazione cellulare: selezione positiva, esaurimento e selezione negativa.

Selezione positiva

L’approccio positivo all’isolamento cellulare è quando il tipo di cellula di interesse è mirato dal meccanismo di rimozione e mantenuto per l’analisi a valle.

La selezione positiva viene in genere eseguita prendendo di mira un marcatore di superficie della cella (CD4, CD8, ecc.) con un anticorpo monoclonale.

Deplezione

La deplezione è quando un singolo tipo di cellula viene preso di mira e rimosso da un campione biologico. Ad esempio, la rimozione dei globuli rossi dalle cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) viene completata tramite l’esaurimento.

Selezione negativa

Simile all’esaurimento, l’approccio di separazione delle cellule negative è quando vengono rimossi diversi tipi di cellule per lasciare intatto un tipo di cella.

Un esempio di selezione negativa è l’esaurimento di tutte le cellule ad eccezione delle cellule T o la rimozione di tutte le cellule ad eccezione delle cellule B da campioni come sangue intero o midollo osseo.

Quali sono alcuni esempi di separazione cellulare?

I ricercatori ordinano le cellule per una varietà di applicazioni. Ecco alcuni esempi di separazione cellulare:

• Cattura di cellule tumorali circolanti dal sangue(arricchimento CTC)
• Isolamento di cellule immunitarie (cellule T, cellule B, ecc.) dal sangue periferico
• Isolamento dei globuli bianchi dal tessuto
• Preparazione di un campione di sangue separato dal plasma
• Separazione dei batteri patogeni dal cibo

Quali sono le tecnologie di separazione cellulare più comuni?

Diverse tecnologie di separazione delle cellule sono oggi sul mercato, ma le tre più comuni sono fluorescenza-activated cell sorting (FACS), magnetic-activated cell sorting (MACS™), e galleggiabilità-activated cell sorting (BACS™).

FACS

FACS, o tecnologia di selezione delle cellule attivata dalla fluorescenza, etichetta le cellule con marcatori fluorescenti, che potrebbero essere basati su marcatori interni o esterni delle cellule. Le celle vengono misurate e identificate una alla volta e quindi ordinate in base al colore del marcatore.

MACS™

Con la tecnologia MACS™, le particelle magnetiche (nanoscala e microscala) si legano alle cellule attraverso un’interazione anticorpale con i marcatori della superficie cellulare. Quindi, le cellule mirate possono essere isolate magneticamente da un campione.

BACS™

L’ordinamento delle celle attivato dalla galleggiabilità, o BACS™, è un nuovo modo di ordinare le celle. Le microbolle si legano alle cellule attraverso anticorpi marker superficiali. Le cellule mirate vengono quindi rimosse da un campione biologico attraverso la flottazione.

Altre tecnologie

Esistono alcuni altri metodi per la separazione, come la microfluidica, la separazione cellulare mediante centrifugazione e la filtrazione.

Perché le microbolle Akadeum sono la migliore tecnologia di smistamento delle cellule?

Scegliere una tecnologia di separazione cellulare è una decisione difficile. I ricercatori devono valutare diversi metodi di isolamento cellulare per qualità ed efficienza, il tutto considerando finanziamenti, flussi di lavoro e disponibilità.

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