Lector de microplacas de absorbancia

Si busca un nuevo lector de microplacas de absorbancia, debe tener en cuenta algunos factores, ya que el rendimiento del instrumento puede afectar significativamente la calidad de sus datos de investigación.

Selección de longitud de onda
Una capacidad de selección de longitud de onda es obligatoria para un lector de microplacas de absorbancia y depende del tipo de detectores que se utilicen.

Se utilizan comúnmente dos tipos diferentes de detectores: Tubos Fotomultiplicadores (PMT) o espectrómetros de Dispositivos de Acoplamiento de Carga (CCD).

El lector de microplacas basado en PMT requiere una herramienta de selección de longitud de onda entre la fuente de luz y la muestra. Los filtros ópticos o monocromadores seleccionan la longitud de onda deseada antes de enviar la luz a la muestra. De esta manera, solo la luz en una longitud de onda deseada se transmite a través de la muestra, llega al PMT y se cuantifica.

Para escanear espectros o un rango de longitudes de onda, el lector de microplacas basado en PMT requiere un monocromador. Esto selecciona las longitudes de onda deseadas y las mide secuencialmente en movimiento mecánico. Para mediciones de múltiples longitudes de onda discretas, se requieren múltiples mediciones individuales con diferentes filtros o un escaneo monocromático.

El lector de microplacas basado en espectrómetro CCD no requiere una herramienta de selección de longitud de onda. El espectrómetro separa las diferentes longitudes de onda presentes en la luz transmitida a través de la muestra a medida que se dirigen al detector CCD. Esto captura la intensidad de todas las longitudes de onda a la vez. De esta manera, se pueden adquirir espectros, longitudes de onda discretas simples o múltiples en un corto período de tiempo.

Si su aplicación necesita adquisición espectral, los espectrómetros CCD son significativamente más rápidos que los monocromadores, ya que no se requiere escaneo espectral mecánico.

Los instrumentos BMG LABTECH están equipados con un espectrómetro UV/vis para mediciones de absorbancia. Esto captura un espectro de rango completo de 220 a 1000 nm en menos de un segundo/pocillo.

Formatos de microplacas compatibles
Comúnmente en aplicaciones de ciencias de la vida, los ensayos de absorbancia básicos como ELISA se miden en microplacas de 96 pocillos. Sin embargo, si tiene varias muestras y/o desea ahorrar valiosos reactivos o tiempo, también se pueden usar formatos de pocillos 384 y 1536. Solo asegúrese de que el lector de microplacas de absorbancia de su elección también sea capaz de leer el formato de microplacas que planea usar.

Agitación e incubación
Al buscar un lector de microplacas de absorbancia, debe tener en cuenta la naturaleza de su investigación y del ensayo que desea ejecutar. En general, la agitación y la incubación son dos características importantes. La incubación es de vital importancia cuando se ejecutan ensayos enzimáticos a temperaturas estables, por ejemplo, 37° C. Las múltiples opciones de agitación permiten una mezcla adecuada de las muestras. Para aplicaciones como ensayos de crecimiento celular en bacterias o levaduras (OD600), la agitación es crucial para una buena oxigenación y la consiguiente replicación celular rápida.

Compatibilidad con cubetas
Tradicionalmente, las mediciones de absorbancia se realizaban en cubetas con una longitud de recorrido normalizada de 1 cm. En microplacas, la longitud de la ruta cambia dependiendo del volumen y el formato de la placa. Si se miden soluciones acuosas, la medición de la microplaca se puede normalizar mediante la corrección de la longitud de la trayectoria de pico de agua. Si a pesar de esta opción, para su investigación todavía necesita ocasionalmente muestras de medición en cubetas, asegúrese de que el lector de microplacas de su elección tenga un puerto de cubeta integrado como el SPECTROstar Nano o adaptadores de placa para medir cubetas horizontalmente como la placa LVis.

Software para reducción de datos
En general, el software que ejecuta el lector de microplacas es una parte muy subestimada del paquete. Para algunos lectores, el software solo controla el proceso de medición y proporciona una salida de datos sin procesar. En otros casos, puede realizar análisis de datos complejos.

Un software completo, fácil de usar y flexible puede hacer la vida más fácil, simplificar la detección y el análisis de datos para que pueda aprovechar al máximo su instrumento.

Las características de cálculo más útiles incluyen la resta automática de espacios en blanco, el cálculo automático de concentraciones de muestras basado en curvas estándar para ensayos ELISA o en la ley de Beer-Lambert, relaciones 260/280, correcciones de longitud de recorrido y constantes enzimáticas como Km y Vmax.

En el paquete de software BMG LABTECH, los ensayos más comunes tienen protocolos predefinidos específicos para ensayos de ejecución rápida y plantillas dedicadas de reducción de datos. A través de estas soluciones dedicadas, la adquisición y el análisis de datos se realizan con un solo clic del ratón, lo que permite a los investigadores llevar a cabo experimentos de forma rápida y sencilla.