Absorbance microplate reader

Als u op de markt bent voor een nieuwe absorbance microplate reader, zijn er een paar factoren waarmee rekening moet worden gehouden, omdat de prestaties van het instrument de kwaliteit van uw onderzoeksgegevens aanzienlijk kunnen beïnvloeden.

Golflengteselectie
een mogelijkheid tot golflengteselectie is verplicht voor een absorptiemicroplaatlezer en is afhankelijk van het type detectoren dat wordt gebruikt.

twee verschillende soorten detectoren worden gewoonlijk gebruikt: Spectrometers voor fotomultiplicatorbuizen (PMTs) of Charge Coupled Device (CCD).

de op PMT gebaseerde microplaatlezer vereist een golflengteselectie tussen lichtbron en monster. Optische filters of monochrommers selecteren de gewenste golflengte voordat het licht naar het monster wordt verzonden. Op deze manier wordt slechts het licht bij een gewenste golflengte door de steekproef overgebracht, bereikt PMT, en gekwantificeerd.

voor het scannen van spectra of een golflengtebereik heeft de op PMT gebaseerde microplaatlezer een monochromator nodig. Dit selecteert de gewenste golflengten en meet ze achtereenvolgens op mechanische beweging. Voor metingen van meerdere discrete golflengten zijn meerdere afzonderlijke metingen met verschillende filters of een monochromatorscan vereist.

voor de op CCD-spectrometer gebaseerde microplaatlezer is geen golflengteselectiehulpmiddel nodig. De spectrometer scheidt de verschillende golflengten huidig in het licht dat door de steekproef wordt overgebracht aangezien deze op de CCD detector worden geleid. Dit vangt de intensiteit van alle golflengten tegelijk. Op deze manier kunnen spectra, enkele of meerdere discrete golflengten worden verkregen in een korte tijd.

als uw toepassing spectrale acquisitie nodig heeft, zijn CCD-spectrometers aanzienlijk sneller dan monochromatografen, omdat mechanische spectrale scanning niet vereist is.

BMG LABTECH instruments zijn uitgerust met een UV / vis spectrometer voor absorptiemetingen. Dit vangt een volledig spectrum van 220 tot 1000 nm in minder dan een seconde/put.

compatibele microplaatformaten
in biowetenschappelijke toepassingen worden basisabsorptiebepalingen zoals ELISA gemeten in 96-boorputmicroplaten. Als u echter meerdere monsters hebt en / of kostbare reagentia of tijd wilt besparen, kunnen ook 384 en 1536 goedformaten worden gebruikt. Zorg ervoor dat uw absorbance microplaatlezer naar keuze ook in staat is om het microplaatformaat te lezen dat u van plan bent te gebruiken.

schudden en incuberen
bij het zoeken naar een absorptiemicroplaatlezer dient u rekening te houden met de aard van uw onderzoek en van de test die u wilt uitvoeren. Over het algemeen zijn schudden en incubatie twee belangrijke kenmerken. Incubatie is van cruciaal belang bij het uitvoeren van enzymatische analyses bij stabiele temperaturen, bijvoorbeeld 37° C. meerdere schudopties maken een juiste menging van de monsters mogelijk. Voor toepassingen zoals de analyses van de celgroei in bacteriën of gist (OD600), is het schudden essentieel voor een goede oxygenatie en consequente snelle celreplicatie.

compatibiliteit met cuvetten
traditioneel werden absorptiemetingen uitgevoerd bij cuvetten met een genormaliseerde weglengte van 1 cm. In microplaten verandert de padlengte afhankelijk van volume en plaatformaat. Als waterige oplossingen worden gemeten, kan de microplaatmeting worden genormaliseerd door de water-piekweglengtecorrectie te gebruiken. Als u ondanks deze optie voor uw onderzoek nog af en toe monsters in cuvetten wilt meten, zorg er dan voor dat de microplaatlezer naar keuze een geïntegreerde cuvetpoort heeft zoals de SPECTROstar Nano, of plaatadapters voor het horizontaal meten van cuvetten zoals de Lvis-plaat.

Software voor gegevensreductie
in het algemeen is de software die de microplaatlezer uitvoert een zeer onderschat onderdeel van het pakket. Voor sommige lezer, de software regelt alleen het meetproces en biedt een ruwe data-uitvoer. In andere gevallen kan het complexe gegevensanalyse uitvoeren.

een uitgebreide, gebruiksvriendelijke en flexibele software kan het leven gemakkelijker maken, detectie en gegevensanalyse vereenvoudigen, zodat u het meeste uit uw instrument kunt halen.

de meest bruikbare berekeningskenmerken zijn onder meer automatische blanco-aftrekking, automatische berekening van monsterconcentraties op basis van standaardkrommen voor ELISA-assays of op basis van de wet bier-Lambert, 260/280-verhoudingen, correcties van padlengte en enzymatische constanten zoals Km en Vmax.

op het BMG LABTECH-softwarepakket hebben de meest voorkomende tests vooraf gedefinieerde quick-run assay-specifieke protocollen en Specifieke gegevensreductiesjablonen gedefinieerd. Door middel van deze speciale oplossingen, data-acquisitie en analyse worden uitgevoerd met een enkele muisklik, waardoor onderzoekers om experimenten snel en gemakkelijk uit te voeren.