Absorbance microplate reader

om du är på marknaden för en ny absorbance microplate reader finns det några faktorer att ta hänsyn till, eftersom instrumentets prestanda kan påverka kvaliteten på dina forskningsdata avsevärt.

Våglängdsval
en våglängdsvalskapacitet är obligatorisk för en absorbansmikroplattläsare och är beroende av vilken typ av detektorer som används.

två olika typer av detektorer används ofta: Fotomultiplikatorrör (PMT) eller Laddningskopplad enhet (CCD) spektrometrar.

den PMT-baserade mikroplattläsaren kräver ett våglängdsvalverktyg mellan ljuskälla och prov. Optiska filter eller monokromatorer väljer önskad våglängd innan ljuset skickas till provet. På detta sätt överförs endast ljuset vid en önskad våglängd genom provet, når PMT och kvantifieras.

för att skanna spektra eller ett våglängdsområde kräver den PMT-baserade mikroplattläsaren en monokromator. Detta väljer de önskade våglängderna och mäter dem sekventiellt vid mekanisk rörelse. För mätningar av flera diskreta våglängder krävs flera enstaka mätningar med olika filter eller en monokromatorskanning.

den CCD-spektrometerbaserade mikroplattläsaren kräver inte ett våglängdsvalverktyg. Spektrometern separerar de olika våglängderna som finns i ljuset som överförs genom provet när dessa riktas mot CCD-detektorn. Detta fångar intensiteten av alla våglängder på en gång. På så sätt kan spektra, enkla eller flera diskreta våglängder förvärvas på kort tid.

om din applikation behöver spektralförvärv är CCD-spektrometrar betydligt snabbare än monokromatorer, eftersom mekanisk spektralskanning inte krävs.

BMG LABTECH-instrument är utrustade med en UV/vis-spektrometer för absorptionsmätningar. Detta fångar ett komplett spektrum från 220 till 1000 nm på mindre än en sekund/brunn.

kompatibla mikroplattformat
vanligtvis i life science-applikationer mäts grundläggande absorbansanalyser som ELISA i 96 brunnsmikroplattor. Men om du har flera prover och / eller vill spara värdefulla reagenser eller tid kan 384 och 1536 brunnformat också användas. Se bara till att din absorbance microplate-läsare också kan läsa det mikroplattformat du planerar att använda.

skakning och inkubation
när du letar efter en absorbansmikroplattläsare bör du överväga arten av din forskning och den analys du vill köra. I allmänhet är skakning och inkubation två viktiga funktioner. Inkubation är kritiskt viktigt när man kör enzymatiska analyser vid stabila temperaturer, t.ex. 37 C. flera skakningsalternativ möjliggör en korrekt blandning av proverna. För applikationer som celltillväxtanalyser i bakterier eller jäst (OD600) är skakning avgörande för en god syresättning och därmed snabb cellreplikation.

kompatibilitet med kyvetter
traditionellt utfördes absorbansmätningar i kyvetter med en normaliserad banlängd på 1 cm. I mikroplattor ändras banlängden beroende på volym och plattformat. Om vattenhaltiga lösningar mäts kan mikroplattmätningen normaliseras med hjälp av korrigering av banlängden för vattentopp. Om du trots det här alternativet, för din forskning, fortfarande ibland behöver mäta prover i kyvetter, se till att den valda mikroplattläsaren antingen har en integrerad kyvettport som SPECTROstar Nano eller plattadaptrar för mätning av kyvetter horisontellt som LVis-plattan.

programvara för datareduktion
generellt är programvaran som kör mikroplattläsaren en mycket underskattad del av paketet. För vissa läsare styr programvaran bara mätprocessen och ger en rådata. I andra fall kan den utföra komplex dataanalys.

en omfattande, lättanvänd och flexibel programvara kan göra livet enklare, förenkla detektering och dataanalys så att du kan få ut det mesta av ditt instrument.

de mest användbara beräkningsfunktionerna inkluderar automatisk blank subtraktion, automatisk beräkning av provkoncentrationer baserat på standardkurvor för ELISA-analyser eller på Beer-Lambert-lagen, 260/280-förhållanden, väglängdskorrigeringar och enzymatiska konstanter som Km och Vmax.

på BMG LABTECH-mjukvarupaketet har de vanligaste analyserna fördefinierade snabbkörningsspecifika protokoll och dedikerade datareduktionsmallar. Genom dessa dedikerade lösningar utförs datainsamling och analys med ett enda musklick, vilket gör det möjligt för forskare att utföra experiment snabbt och enkelt.