Agar de Dextrosa de Patata (PDA): Principio, Composición, Características de la Colonia

Última actualización el 17 de junio de 2021

El agar de dextrosa de patata (PDA) es un medio basal de uso general para la identificación, cultivo y enumeración de levaduras y mohos en alimentos y productos lácteos. También se puede utilizar para el cultivo de levaduras y mohos de muestras clínicas. Dado que estimula la esporulación y la pigmentación, también ayuda a cultivar y diferenciar hongos patógenos y no patógenos.

El PDA también es útil para mantener cultivos de stock de ciertos dermatofitos. Ciertos antibióticos o ácidos como el cloranfenicol, el ácido tartárico y la clortetraciclina se pueden agregar como agentes selectivos.

El agar de dextrosa de patata con ácido tartárico (TA) se recomienda para el examen microbiano de alimentos y productos lácteos. La adición de clortetraciclina se recomienda para la enumeración microbiana de levadura y moho de cosméticos. El agar de dextrosa de patata con cloranfenicol se recomienda para el cultivo selectivo de hongos a partir de muestras mixtas.

Principio

El agar de dextrosa de patata (PDA) contiene dextrosa como fuente de carbohidratos que sirve como estimulante del crecimiento e infusión de patata que proporciona una base nutritiva para el crecimiento exuberante de la mayoría de los hongos. El agar se añade como agente solidificante. Se puede incorporar una cantidad específica de ácido tartárico estéril (10%) para reducir el pH del medio a 3,5, de modo que se inhiba el crecimiento bacteriano.

Se debe tener cuidado de no recalentar el medio acidificado; el calentamiento en estado ácido hidrolizará el agar, lo que puede hacer que el agar no se solidifique.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 a 25°C)

Clortetraciclina – 40 mg

Procedimiento para la preparación de medios

1. Suspender 39 gramos de medios deshidratados (suministrados por proveedores comerciales) en 1000 ml de agua destilada. Calentar a ebullición para disolver el medio por completo.
2. Esterilice mediante autoclave a 15 libras de presión (121°C) durante 15 minutos. Mezclar bien antes de dispensar.
3. En trabajos específicos, cuando se requiere un pH de 3,5, el medio debe acidificarse con ácido tartárico estéril al 10%. La cantidad de ácido necesaria para 100 ml. de medio estéril enfriado es de aproximadamente 1 ml. No calentar el medio después de añadir el ácido.
4. Para el procesamiento de la muestra, rayar la muestra en el medio con un bucle de inoculación estéril para obtener colonias aisladas.
5. Incubar las placas a 25-30°C en posición invertida (con el lado de agar hacia arriba) con mayor humedad.
6. Los cultivos deben examinarse al menos semanalmente para detectar el crecimiento de hongos y deben mantenerse durante 4-6 semanas antes de ser notificados como negativos.

Resultado

Las levaduras crecerán como colonias cremosas a blancas. Los mohos crecerán como colonias filamentosas de varios colores.

morfología de las colonias Típicas de algunos hongos

Cuente el número de colonias y tenga en cuenta el factor de dilución (si la muestra de ensayo se diluyó) para determinar los recuentos de levadura y/o moho por gramo o mililitro de material.