Potato Dekstrose Agar (PDA): Principle, Composition, Colony Characteristics

Last updated on June 17th, 2021

Potato dekstrose agar (PDA) is a general-purpose basal medium for the identification, culture, and enumeration of hiiva and homes in foods and dairy products. Sitä voidaan käyttää myös hiivojen ja homeiden viljelyyn kliinisistä näytteistä. Koska se stimuloi itiöemiä ja pigmentaatiota, se auttaa myös patogeenisten ja ei-patogeenisten sienten viljelyssä ja erottamisessa toisistaan.

PDA on myös hyödyllinen ylläpitämään varastoviljelmiä tiettyjen dermatofyyttien. Selektiivisinä aineina voidaan lisätä tiettyjä antibiootteja tai happoja, kuten kloramfenikolia, viinihappoa ja klooritetrasykliiniä.

peruna-dekstroosi-agaria TA: lla (viinihappo) suositellaan elintarvikkeiden ja maitotuotteiden mikrobitutkimukseen. Klooritetrasykliinin lisäämistä suositellaan hiivan ja kosmetiikan homeen mikrobiluetteloon. Perunan dekstroosi-agaria, jossa on kloramfenikolia, suositellaan sienten valikoivaan viljelyyn sekanäytteistä.

periaate

peruna-dekstroosi-agar (PDA) sisältää dekstroosia hiilihydraattilähteenä, joka toimii kasvua stimuloivana aineena, ja peruna-infuusio, joka tarjoaa ravintoainepohjan useimpien sienten rehevälle kasvulle. Agar lisätään jähmettymisaineena. Liuokseen voidaan lisätä tietty määrä steriiliä viinihappoa (10%), jotta elatusaineen pH-arvo saadaan laskettua arvoon 3,5, jotta bakteerien kasvu estyy.

on huolehdittava siitä, ettei happamoitunutta ainetta uudelleenlämmitetä; happotilassa kuumentaminen hydrolysoi agarin, jolloin agar ei voi jähmettyä.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 25°C: ssa)

Klooritetrasykliini – 40 mg

menettely väliaineiden valmistamiseksi

1. suspendoidaan 39 grammaa (kaupallisten toimittajien toimittamaa) kuivattua väliainetta 1000 ml: aan tislattua vettä. Kuumenna kiehuvaksi liuottaaksesi väliaineen kokonaan.
2. steriloidaan autoklavoimalla 15 paunan paineessa (121°c) 15 minuutin ajan. Sekoita hyvin ennen annostelua.
3. erityisessä työssä, kun vaaditaan pH 3, 5, liuos on happamoitava steriilillä 10-prosenttisella viinihapolla. Tarvittava happomäärä 100 ml: aan. steriiliä, jäähdytettyä väliainetta on noin 1 ml. Älä lämmitä väliainetta hapon lisäämisen jälkeen.
4. näytteen käsittelyä varten näyte johdetaan steriilillä siirrostussilmukalla väliaineeseen eristettyjen pesäkkeiden muodostamiseksi.
5. levyjä inkuboidaan 25-30°C: ssa ylösalaisin käännetyssä asennossa (agar puoli ylöspäin), jolloin kosteus lisääntyy.
6. viljelmiä on tutkittava vähintään viikoittain sienikasvustojen varalta, ja niitä on pidettävä 4 – 6 viikon ajan, ennen kuin ne ilmoitetaan negatiivisiksi.

tulos

hiivat kasvavat kermanvalkoisina yhdyskuntina. Homeet kasvavat rihmamaisina erivärisinä pesäkkeinä.

eräiden sienten tyypillinen pesäkemorfologia

lasketaan pesäkkeiden lukumäärä ja otetaan huomioon laimennuskerroin (jos testinäyte on laimennettu) määritettäessä hiiva-ja/tai muotimääriä grammaa tai millilitraa kohti.