Potet Dextrose Agar (PDA): Prinsipp, Sammensetning, Koloniegenskaper

Sist oppdatert 17. juni 2021

Potet dextrose agar (PDA) Er et generelt basalt medium for identifisering, dyrking og oppregning av gjær og mugg i matvarer og meieriprodukter. Det kan også brukes til dyrking av gjær og mugg fra kliniske prøver. Siden det stimulerer sporulering og pigmentering, hjelper det også med å dyrke og differensiere patogene og ikke-patogene sopp.

PDA er også nyttig for å opprettholde lagerkulturer av visse dermatofytter. Visse antibiotika eller syrer som kloramfenikol, vinsyre og klortetracyklin kan tilsettes som selektive midler.

Potet dextrose agar MED TA (vinsyre) anbefales for mikrobiell undersøkelse av mat og meieriprodukter. Tilsetning av klortetracyklin anbefales for mikrobiell opptelling av gjær og mugg fra kosmetikk. Potet dextrose agar med kloramfenikol anbefales for selektiv dyrking av sopp fra blandede prøver.

Prinsipp

Potet dextrose agar (PDA) inneholder dextrose som karbohydratkilde som fungerer som vekststimulerende og potetinfusjon som gir et næringsgrunnlag for frodig vekst av de fleste sopp. Agar er tilsatt som størkningsmidlet. En spesifisert mengde steril vinsyre (10%) kan inkorporeres for å senke ph i mediet til 3,5 slik at bakterieveksten hemmes.

Det Må Tas Hensyn til ikke å oppvarme det surgjorte mediet; oppvarming i syretilstanden vil hydrolysere agaren som kan gjøre agaren ute av stand til å størkne.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 ved 25°C)

Klortetracyklin – 40 mg

Fremgangsmåte for Fremstilling av medier

1. Suspender 39 gram dehydrerte medier (levert av kommersielle leverandører) i 1000 ml destillert vann. Varm til koking for å oppløse mediet helt.
2. Steriliser ved autoklavering ved 15 lbs trykk (121°C) i 15 minutter. Bland godt før dispensering.
3. i spesifikt arbeid, når pH 3,5 er nødvendig, bør mediet surgjøres med steril 10% vinsyre. Mengden syre som kreves for 100 ml. av sterilt, avkjølt medium er omtrent 1 ml. Ikke varm mediet etter tilsetning av syren.
4. strek prøven på mediet med en steril inokuleringssløyfe for å oppnå isolerte kolonier.
5. Inkuber platene ved 25 – 30°C i omvendt stilling (agar side opp) med økt fuktighet.
6. Kulturer bør undersøkes minst ukentlig for soppvekst og bør holdes i 4-6 uker før de rapporteres som negative.

Resultat

Gjær vil vokse som kremete til hvite kolonier. Former vil vokse som filamentøse kolonier av forskjellige farger.

Typisk kolonimorfologi av noen sopp

Tell antall kolonier og vurder fortynningsfaktoren (hvis prøven ble fortynnet) ved å bestemme gjær-og / eller muggtallene per gram eller milliliter materiale.