burgonya-dextróz-Agar (PDA): elv, összetétel, kolónia jellemzői

Utoljára frissítve: június 17th, 2021

a burgonya-dextróz-agar (PDA) egy általános célú alapközeg az élesztő és a penészgombák azonosítására, termesztésére és felsorolására az élelmiszerekben és tejtermékekben. Klinikai mintákból származó élesztők és penészgombák termesztésére is használható. Mivel serkenti a sporulációt és a pigmentációt, elősegíti a patogén és nem patogén gombák termesztését és megkülönböztetését.

a PDA bizonyos dermatofiták állománykultúráinak fenntartására is hasznos. Bizonyos antibiotikumok vagy savak, például kloramfenikol, borkősav és klórtetraciklin szelektív szerként adhatók hozzá.

burgonya dextróz agar TA-val (borkősav) ajánlott élelmiszerek és tejtermékek mikrobiális vizsgálatához. A klórtetraciklin hozzáadása ajánlott az élesztő és a penész mikrobiális felsorolásához a kozmetikumokból. A kevert mintákból származó gombák szelektív termesztésére a kloramfenikollal készített burgonya-dextróz-agar ajánlott.

alapelv

a burgonya-dextróz agar (PDA) szénhidrátforrásként dextrózt tartalmaz, amely növekedésserkentőként és burgonya infúzióként szolgál, amely tápanyagbázist biztosít a legtöbb gomba dús növekedéséhez. A keményítőszerként agart adunk hozzá. Meghatározott mennyiségű steril borkősavat (10%) lehet beépíteni a közeg pH-jának 3,5-re történő csökkentésére, hogy a baktériumok szaporodása gátolt legyen.

ügyelni kell arra, hogy a savanyított közeget ne melegítsük újra; savas állapotban történő hevítés hidrolizálja az agart, ami az agart nem képes megszilárdulni.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 25 6c. (C)

Klórtetraciklin-40 mg

közeg előállítására vonatkozó eljárás

1. 39 gramm dehidratált közeget (kereskedelmi beszállítók által szállított) 1000 ml desztillált vízben kell felfüggeszteni. Melegítsük forrásig, hogy a közeg teljesen feloldódjon.
2. sterilizáljuk autoklávozással 15 lbs nyomáson (121 db C) 15 percig. Adagolás előtt alaposan keverje össze.
3. speciális munkában, ha 3,5 pH-ra van szükség, a táptalajt steril 10% borkősavval kell megsavanyítani. A szükséges sav mennyisége 100 ml. steril, hűtött közeg körülbelül 1 ml. A sav hozzáadása után ne melegítse a közeget.
4. a minta feldolgozásához a mintát steril oltóhurokkal a táptalajra kell csavarni, hogy izolált telepeket kapjunk.
5. inkubáljuk a lemezeket 25 – 30 Kb C-on fordított helyzetben (agar oldalával felfelé), megnövekedett páratartalom mellett.
6. a tenyészeteket legalább hetente meg kell vizsgálni a gombanövekedés szempontjából, és 4 – 6 hétig kell tartani, mielőtt negatív eredményt jelentenek.

eredmény

az élesztők krémes vagy fehér telepekként nőnek. A formák különböző színű fonalas telepekként nőnek.

egyes gombák tipikus kolónia morfológiája

számolja meg a telepek számát, és vegye figyelembe a hígítási tényezőt (ha a vizsgálati mintát hígították) az élesztő és/vagy penészszám grammra vagy milliliter anyagra vonatkoztatva történő meghatározásakor.