Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA): Prinzip, Zusammensetzung, Kolonieeigenschaften

Zuletzt aktualisiert am 17. Juni 2021

Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA) ist ein universelles Basismedium zur Identifizierung, Kultivierung und Aufzählung von Hefen und Schimmelpilzen in Lebensmitteln und Milchprodukten. Es kann auch zur Kultivierung von Hefen und Schimmelpilzen aus klinischen Proben verwendet werden. Da es die Sporulation und Pigmentierung stimuliert, hilft es auch bei der Kultivierung und Unterscheidung pathogener und nicht pathogener Pilze.

PDA ist auch nützlich, um Bestandskulturen bestimmter Dermatophyten zu erhalten. Bestimmte Antibiotika oder Säuren wie Chloramphenicol, Weinsäure und Chlortetracyclin können als selektive Mittel zugesetzt werden.

Kartoffel-Dextrose-Agar mit TA (Weinsäure) wird für die mikrobielle Untersuchung von Lebensmitteln und Milchprodukten empfohlen. Die Zugabe von Chlortetracyclin wird zur mikrobiellen Aufzählung von Hefen und Schimmelpilzen aus Kosmetika empfohlen. Kartoffel-Dextrose-Agar mit Chloramphenicol wird für die selektive Kultivierung von Pilzen aus gemischten Proben empfohlen.

Prinzip

Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA) enthält Dextrose als Kohlenhydratquelle, die als Wachstumsstimulans dient, und Kartoffelinfusion, die eine Nährstoffbasis für ein üppiges Wachstum der meisten Pilze bietet. Als Verfestigungsmittel wird Agar zugegeben. Eine bestimmte Menge steriler Weinsäure (10%) kann eingearbeitet werden, um den pH-Wert des Mediums auf 3,5 zu senken, so dass das Bakterienwachstum gehemmt wird.

Es sollte darauf geachtet werden, das angesäuerte Medium nicht erneut zu erhitzen; Erhitzen im sauren Zustand hydrolysiert den Agar, wodurch der Agar nicht erstarren kann.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 bei 25 ° C)

Chlortetracyclin – 40 mg

Verfahren zur Herstellung von Medien

1. Suspendieren Sie 39 g dehydrierte Medien (von kommerziellen Anbietern geliefert) in 1000 ml destilliertem Wasser. Hitze zum Kochen, um das Medium vollständig aufzulösen.
2. Sterilisieren durch Autoklavieren bei 15 lbs Druck (121 ° C) für 15 Minuten. Vor der Abgabe gut mischen.
3. Bei bestimmten Arbeiten, wenn ein pH-Wert von 3,5 erforderlich ist, sollte das Medium mit steriler 10% iger Weinsäure angesäuert werden. Die für 100 ml erforderliche Säuremenge. steriles, gekühltes Medium beträgt etwa 1 ml. Erhitzen Sie das Medium nach Zugabe der Säure nicht.
4. Zur Verarbeitung der Probe die Probe mit einer sterilen Impfschlaufe auf das Medium streichen, um isolierte Kolonien zu erhalten.
5. Die Platten bei 25 – 30°C in umgekehrter Position (Agarseite nach oben) mit erhöhter Luftfeuchtigkeit inkubieren.
6. Kulturen sollten mindestens wöchentlich auf Pilzwachstum untersucht und 4 – 6 Wochen aufbewahrt werden, bevor sie als negativ gemeldet werden.

Hefen wachsen als cremige bis weiße Kolonien. Schimmelpilze wachsen als filamentöse Kolonien verschiedener Farben.

Typische Koloniemorphologie einiger Pilze

Zählen Sie die Anzahl der Kolonien und berücksichtigen Sie den Verdünnungsfaktor (wenn die Testprobe verdünnt wurde) bei der Bestimmung der Hefe- und / oder Schimmelpilzzahlen pro Gramm oder Milliliter Material.