Kartoffeldestroseagar (PDA): princip, sammensætning, Kolonikarakteristika

sidst opdateret den 17.juni 2021

Kartoffeldestroseagar (PDA) er et generelt basalt medium til identifikation, dyrkning og optælling af gær og forme i fødevarer og mejeriprodukter. Det kan også anvendes til dyrkning af gær og forme fra kliniske prøver. Da det stimulerer sporulation og pigmentering, hjælper det også med at dyrke og differentiere patogene og ikke-patogene svampe.

PDA er også nyttig til opretholdelse af stamkulturer af visse dermatofytter. Visse antibiotika eller syrer som chloramphenicol, vinsyre og chlortetracyclin kan tilsættes som selektive midler.

kartoffeldestroseagar med TA (vinsyre) anbefales til mikrobiel undersøgelse af fødevarer og mejeriprodukter. Tilsætning af chlortetracyclin anbefales til mikrobiel optælling af gær og skimmel fra kosmetik. Kartoffeldestroseagar med chloramphenicol anbefales til selektiv dyrkning af svampe fra blandede prøver.

princip

Kartoffeldestroseagar (PDA) indeholder drudestroseagar som kulhydratkilde, der tjener som vækststimulerende middel og kartoffelinfusion, der giver en næringsbase til frodig vækst af de fleste svampe. Agar tilsættes som størkningsmiddel. En specificeret mængde steril vinsyre (10%) kan inkorporeres for at sænke mediumets pH til 3,5, så bakterievækst hæmmes.

der skal udvises forsigtighed for ikke at genopvarme det syrnede medium; opvarmning i syretilstand hydrolyserer agaren, hvilket kan gøre agaren ude af stand til at størkne.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 ved 25 liter C)

chlortetracyclin – 40 mg

fremgangsmåde til fremstilling af medier

1. suspendere 39 gram dehydreret medier (leveret af kommercielle leverandører) i 1000 ml destilleret vand. Varm til kogning for at opløse mediet fuldstændigt.
2. steriliser ved autoklavering ved 15 lbs tryk (121 liter C) i 15 minutter. Bland godt inden dispensering.
3. i specifikt arbejde, når pH 3,5 er påkrævet, skal mediet syrnes med steril 10% vinsyre. Mængden af syre kræves til 100 ml. af sterilt, afkølet medium er ca. 1 ml. Opvarm ikke mediet efter tilsætning af syren.
4. til behandling af prøven, streg prøven på mediet med en steril inokuleringssløjfe for at opnå isolerede kolonier.
5. inkuber pladerne ved 25 – 30 liter C i en omvendt position (agarsiden opad) med øget fugtighed.
6. kulturer bør undersøges mindst ugentligt for svampevækst og bør holdes i 4 – 6 uger, før de rapporteres som negative.

resultat

gær vil vokse som cremet til hvide kolonier. Forme vil vokse som filamentøse kolonier af forskellige farver.

typisk kolonimorfologi af nogle svampe

Tæl antallet af kolonier, og overvej fortyndingsfaktoren (hvis testprøven blev fortyndet) ved bestemmelse af gær-og/eller formtællinger pr.gram eller milliliter materiale.