Potato Dextrose Agar(PDA):原理、組成、コロニー特性
Last updated on June17th,2021
Potato dextrose agar(PDA)は、食品や乳製品の酵母やカビの同定、栽培、列挙のための汎用基礎培地である。 それはまた臨床標本からのイーストそして型の耕作に使用するかもしれません。 それは胞子形成および色素沈着を刺激するので、病原性および非病原性の真菌の栽培および分化を助ける。
PDAは、特定の皮膚糸状菌のストック培養物を維持するためにも有用である。 クロラムフェニコール、酒石酸およびクロルテトラサイクリンのような特定の抗生物質または酸は、選択的薬剤として添加することができる。
食品や乳製品の微生物検査には、Ta(酒石酸)を含むジャガイモのデキストロース寒天が推奨されています。 Chlortetracyclineの付加は化粧品からのイーストそして型の微生物列挙のために推薦されます。 クロラムフェニコールを含むジャガイモのデキストロース寒天は、混合試料からの真菌の選択的栽培に推奨される。
原則
ジャガイモのデキストロース寒天(PDA)は、ほとんどの真菌の豊かな成長のための栄養基盤を提供する成長刺激剤およびジャガイモ注入とし 固化剤として寒天を添加する。 細菌の増殖が阻害されるように、培地のpHを3.5に低下させるために、指定量の滅菌酒石酸(10%)を配合することができる。
酸性化された媒体を再加熱しないように注意する必要があります;酸性状態で加熱すると寒天が加水分解され、寒天が凝固できなくなる可能性があ
Composition of PDA
Ingredients | Gm/L |
Dextrose | 20 g |
Potato extract | 4 g* |
Agar | 15 g |
*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion
If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)
Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2at25°C)
クロルテトラサイクリン–40mg
培地の調製手順
- 39グラムの脱水培地(商業サプライヤーから供給)を蒸留水1000mlに懸濁す。 媒体を完全に溶解するために沸騰するまで加熱する。
- 圧力15ポンド(121°C)でオートクレーブにより15分間滅菌します。 分配する前によく混合して下さい。
- 特定の作業では、pH3.5が必要な場合は、培地を滅菌した10%酒石酸で酸性化する必要があります。 100mlに必要な酸の量。 滅菌された冷却培地は約1mlである。 酸を添加した後は媒体を加熱しないでください。
- 試料の処理のために、単離されたコロニーを得るために、滅菌接種ループで培地上に試料をストリークする。
- プレートを25–30℃の逆位置(寒天側を上に)で湿度を上げてインキュベートする。
- 培養物は少なくとも毎週真菌の増殖について検査され、陰性と報告される前に4–6週間保持されるべきである。
結果
酵母はクリーミーから白いコロニーとして成長します。 金型は、様々な色の糸状コロニーとして成長します。
いくつかの真菌の典型的なコロニー形態
菌類 | コロニー特性 | ||||
テクスチャ | 表面の色 | リバースカラー | ゾーン | スポルレーション | |
A.candidus | ビロードのような厚い | クリームがかった白 | わずかにクリームがかった | 放射状に逆に溝 | 中程度 |
A.ニジェール | 比較 | ホワイトや典型的な黒の胞子 | 黄 | 大furrowedの逆 | 重 |
A.sulphureus | 比較 | 汚れ白と黄色の胞子のセンター | オレンジチョコレート色 | やや放射状にfurrowed | 緩やかな |
A. versicolor | Floccose | 白からオレンジ-中心に緑の胞子を持つクリーム | 明るいオレンジ | 逆に大きくしわ | 中程度 |
Penicillium corylophilum | ビロードのような | ダークグリーン | 無色からクリーム状 | 浅い中心と放射状に畝状の隆起マージン | 中程度 |
P. expansum | ビロードのような | 明確な滲出液と明確な滅菌白マージンを持つ暗緑色 | 黄色 | 放射状に溝 | 重い |
Penicillium spp | 粉末状 | オリーブグリーン、滅菌白マージン付き | オレンジから赤、しわ | 放射状にしわ | 重い |
Fusarium oxysporum | Floccose | マゼンタ-ピンク | マゼンタ-レッドターニングバイオレット | 暗いと明るい赤みがかった着色の同心円ゾーンを持つ | 貧しい |
コロニーの数を数え、材料のグラムまたはミリリットルごとのイーストや型の計算の希薄の要因を(テストサンプルが薄くなったら)考慮して下さい。
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