Agar dekstrozy ziemniaczanej (PDA): zasada, skład, charakterystyka Kolonii

Last updated on June 17th, 2021

Agar dekstrozy ziemniaczanej (PDA) jest podstawowym podłożem ogólnego przeznaczenia do identyfikacji, uprawy i wyliczania drożdży i form w żywności i produktach mlecznych. Może być również stosowany do uprawy drożdży i pleśni z okazów klinicznych. Ponieważ stymuluje sporulację i pigmentację, pomaga również w uprawie i różnicowaniu grzybów patogennych i niepatogennych.

PDA jest również przydatny do utrzymania hodowli zasobów niektórych dermatofitów. Niektóre antybiotyki lub kwasy, takie jak chloramfenikol, kwas winowy i chlortetracyklina, mogą być dodawane jako środki selektywne.

agar dekstrozy ziemniaczanej z TA (kwasem winowym) jest zalecany do badania mikrobiologicznego żywności i produktów mlecznych. Dodatek chlortetracykliny jest zalecany do mikrobiologicznego wyliczenia drożdży i pleśni z kosmetyków. Agar dekstrozy ziemniaczanej z chloramfenikolem jest zalecany do selektywnej uprawy grzybów z próbek mieszanych.

zasada

Agar dekstrozy ziemniaczanej (PDA) zawiera dekstrozę jako źródło węglowodanów, które służy jako stymulator wzrostu i napar ziemniaczany, który stanowi podstawę odżywczą dla bujnego wzrostu większości grzybów. Jako środek zestalający dodaje się Agar. Określona ilość sterylnego kwasu winowego (10%) może być włączona w celu obniżenia pH pożywki do 3,5, tak aby zahamować wzrost bakterii.

należy uważać, aby nie podgrzać zakwaszonego podłoża;ogrzewanie w stanie kwaśnym zhydrolizuje agar, co może spowodować, że agar nie będzie w stanie zestalić.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 w temperaturze 25°C)

Chlortetracyklina – 40 mg

procedura przygotowania mediów

1. Zawieś 39 gramów odwodnionych mediów (dostarczanych przez dostawców komercyjnych) w 1000 ml wody destylowanej. Podgrzać do wrzenia, aby całkowicie rozpuścić medium.
2. sterylizować w autoklawie pod ciśnieniem 15 funtów (121°C) przez 15 minut. Dobrze wymieszać przed dozowaniem.
3. w specyficznej pracy, gdy wymagane jest pH 3,5, podłoże należy zakwaszać sterylnym 10% kwasem winowym. Ilość kwasu wymagana do 100 ml. sterylnej, schłodzonej pożywki wynosi około 1 ml. Nie podgrzewać podłoża po dodaniu kwasu.
4. w celu przetworzenia próbki należy przyłożyć próbkę do podłoża sterylną pętlą inokulacyjną w celu uzyskania izolowanych Kolonii.
5. inkubować płytki w temperaturze 25-30°C w pozycji odwróconej (strona agaru do góry) ze zwiększoną wilgotnością.
6. kultury powinny być badane co najmniej raz w tygodniu pod kątem wzrostu grzybów i powinny być trzymane przez 4 – 6 tygodni, zanim zostaną stwierdzone jako negatywne.

wynik

drożdże będą rosły w postaci kremowych do białych Kolonii. Pleśnie będą rosły jako nitkowate kolonie o różnych kolorach.

typowa morfologia Kolonii niektórych grzybów

policzyć liczbę kolonii i wziąć pod uwagę współczynnik rozcieńczenia (jeśli próbka badana została rozcieńczona) przy określaniu liczby drożdży i/lub pleśni na gram lub mililitr materiału.