ágar Dextrose de batata (PDA): princípio, composição, características da Colônia

última atualização em 17 de junho de 2021

o ágar dextrose de batata (PDA) é um meio basal de uso geral para a identificação, cultivo e enumeração de leveduras e bolores em alimentos e laticínios. Pode igualmente ser usado para o cultivo das leveduras e dos moldes dos espécimes clínicos. Por estimular a esporulação e a pigmentação, também auxilia no cultivo e diferenciação de fungos patogênicos e não patogênicos.

PDA também é útil para a manutenção de estoque de culturas de certos dermatófitos. Certos antibióticos ou ácidos como cloranfenicol, ácido tartárico e clortetraciclina podem ser adicionados como agentes seletivos.

o ágar dextrose de batata com TA (ácido tartárico) é recomendado para o exame microbiano de alimentos e laticínios. A adição de chlortetracycline é recomendada para a enumeração microbiana do fermento e do molde dos cosméticos. O ágar dextrose de batata com cloranfenicol é recomendado para o cultivo seletivo de fungos de amostras mistas.

princípio

o ágar dextrose de batata (PDA) contém dextrose como fonte de carboidratos que serve como estimulante de crescimento e infusão de batata que fornece uma base nutritiva para o crescimento luxuriante da maioria dos fungos. Ágar é adicionado como agente solidificante. Uma quantidade especificada de ácido tartárico estéril (10%) pode ser incorporada para diminuir o pH do meio para 3,5, de modo que o crescimento bacteriano seja inibido.

deve-se tomar cuidado para não reaquecer o meio acidificado; o aquecimento no estado ácido hidrolisará o ágar, o que pode tornar o ágar incapaz de solidificar.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 a 25°C)

Chlortetracycline – 40 mg

Procedimento de Preparação de media

1. Suspender 39 gramas de desidratado de mídia (fornecidos por fornecedores comerciais) em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio.
2. esterilize por autoclavagem a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Misture bem antes de Dispensar.
3. em trabalhos específicos, quando for necessário pH 3,5, o meio deve ser acidificado com ácido tartárico estéril a 10%. A quantidade de ácido necessária para 100 ml. de estéril, meio resfriado é de aproximadamente 1 ml. Não aqueça o meio após a adição do ácido.
4. para o processamento do espécime, Raia o espécime no meio com um laço inoculando estéril a fim obter colônias isoladas.
5. incubar as placas a 25-30 ° C em posição invertida (lado ágar para cima) com maior umidade.
6. as culturas devem ser examinadas pelo menos semanalmente para o crescimento de fungos e devem ser mantidas por 4 a 6 semanas antes de serem relatadas como negativas.

resultado

as leveduras crescerão como colônias cremosas a brancas. Os moldes crescerão como colônias filamentosas de várias cores.

morfologia Típica das colónias de alguns fungos

conte o número de colônias e considere o Fator de diluição (se a amostra de teste foi diluída) na determinação das contagens de levedura e/ou mofo por grama ou mililitro de material.