Agar de dextroză de cartofi (PDA): principiu, compoziție, caracteristici ale coloniei

actualizat ultima dată pe 17 iunie 2021

Agar de dextroză de cartofi (PDA) este un mediu bazal de uz general pentru identificarea, cultivarea și enumerarea drojdiei și mucegaiurilor din alimente și produse lactate. Poate fi folosit și pentru cultivarea drojdiilor și mucegaiurilor din specimene clinice. Deoarece stimulează sporularea și pigmentarea, ajută și la cultivarea și diferențierea ciupercilor patogene și nepatogene.

PDA este, de asemenea, util pentru menținerea culturilor stoc de anumite dermatofite. Anumite antibiotice sau acizi precum cloramfenicol, acid tartric și clortetraciclină pot fi adăugate ca agenți selectivi.

Agar de dextroză de cartof cu TA (acid tartric) este recomandat pentru examinarea microbiană a alimentelor și a produselor lactate. Adăugarea de clortetraciclină este recomandată pentru enumerarea microbiană a drojdiei și mucegaiului din produse cosmetice. Agar de dextroză de cartofi cu cloramfenicol este recomandat pentru cultivarea selectivă a ciupercilor din probe mixte.

principiu

Agar de dextroză de cartofi (PDA) conține dextroză ca sursă de carbohidrați care servește ca stimulent de creștere și infuzie de cartofi care oferă o bază nutritivă pentru creșterea luxuriantă a majorității ciupercilor. Agar se adaugă ca agent de solidificare. O cantitate specificată de acid tartric steril (10%) poate fi încorporată pentru a reduce pH-ul mediului la 3,5, astfel încât creșterea bacteriană să fie inhibată.

trebuie avut grijă să nu reîncălziți mediul acidificat; încălzirea în stare acidă va hidroliza agarul care poate face ca agarul să nu se poată solidifica.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 la 25 CTC)

clortetraciclină – 40 mg

procedura de preparare a mediilor

1. suspendați 39 grame de medii deshidratate (furnizate de furnizori comerciali) în 1000 ml apă distilată. Se încălzește până la fierbere pentru a dizolva complet mediul.
2. sterilizați prin autoclavare la o presiune de 15 lbs (121 CTC) timp de 15 minute. Se amestecă bine înainte de distribuire.
3. în lucrări specifice, când este necesar pH 3,5, mediul trebuie acidificat cu acid tartric steril 10%. Cantitatea de acid necesară pentru 100 ml. de mediu steril, răcit este de aproximativ 1 ml. Nu încălziți mediul după adăugarea acidului.
4. pentru prelucrarea specimenului, introduceți specimenul pe mediu cu o buclă de inoculare sterilă pentru a obține colonii izolate.
5. se incubează plăcile la 25 – 30 centimetric C într-o poziție inversată (agar cu fața în sus) cu umiditate crescută.
6. culturile trebuie examinate cel puțin săptămânal pentru depistarea fungilor și trebuie ținute timp de 4 – 6 săptămâni înainte de a fi raportate ca fiind negative.

rezultat

drojdiile vor crește ca colonii cremoase până la albe. Mucegaiurile vor crește ca colonii filamentoase de diferite culori.

morfologia tipică a coloniilor unor ciuperci

numărați numărul de colonii și luați în considerare factorul de diluare (dacă proba de testare a fost diluată) pentru a determina numărul de drojdie și/sau mucegai pe gram sau mililitru de material.