Potato Dextrose Agar (PDA): princip, sammansättning, Koloniegenskaper

Senast uppdaterad den 17 juni 2021

Potato dextrose agar (PDA) är ett allmänt basmedium för identifiering, odling och uppräkning av jäst och mögel i livsmedel och mejeriprodukter. Det kan också användas för odling av jäst och mögel från kliniska prover. Eftersom det stimulerar sporulation och pigmentering, hjälper det också till att odla och differentiera patogena och icke-patogena svampar.

PDA är också användbart för att upprätthålla lagerkulturer av vissa dermatofyter. Vissa antibiotika eller syror som kloramfenikol, vinsyra och klortetracyklin kan tillsättas som selektiva medel.

Potatisdextrosagar med TA (vinsyra) rekommenderas för mikrobiell undersökning av livsmedel och mejeriprodukter. Tillsats av klortetracyklin rekommenderas för mikrobiell uppräkning av jäst och mögel från kosmetika. Potatisdextrosagar med kloramfenikol rekommenderas för selektiv odling av svampar från blandade prover.

princip

Potato dextrose agar (PDA) innehåller dextros som en kolhydratkälla som fungerar som ett tillväxtstimulerande medel och potatisinfusion som ger en näringsbas för frodig tillväxt av de flesta svampar. Agar tillsätts som stelningsmedel. En specificerad mängd steril vinsyra (10%) kan införlivas för att sänka mediumets pH till 3,5 så att bakterietillväxt hämmas.

försiktighet bör vidtas för att inte värma upp det surgjorda mediet; uppvärmning i surt tillstånd hydrolyserar agaren som kan göra att agaren inte kan stelna.

Composition of PDA

*4.0gm of potato extract is equivalent to 200gm of potato infusion

If supplement added: tartaric acid – 1.4 gm (pH-3.5 +/- 0.3 at 25°C)

Chloramphenicol – 25 mg ( pH-5.6 +/- 0.2 vid 25 CCL)

Klortetracyklin – 40 mg

förfarande för beredning av media

1. suspendera 39 gram dehydratiserade medier (levereras av kommersiella leverantörer) i 1000 ml destillerat vatten. Värm till kokning för att lösa upp mediet helt.
2. sterilisera genom autoklavering vid 15 lbs-tryck (121 msk C) i 15 minuter. Blanda väl före dosering.
3. i specifikt arbete, när pH 3,5 krävs, bör mediet surgöras med steril 10% vinsyra. Mängden syra som krävs för 100 ml. av sterilt, kylt medium är ca 1 ml. Värm inte mediet efter tillsats av syran.
4. för bearbetning av provexemplar, strimma provexemplaret på mediet med en steril inokuleringsslinga för att erhålla isolerade kolonier.
5. inkubera plattorna vid 25-30 C i ett inverterat läge (agar sida upp) med ökad fuktighet.
6. kulturer bör undersökas minst en gång i veckan för svamptillväxt och bör hållas i 4 – 6 veckor innan de rapporteras som negativa.

resultat

jäst kommer att växa som krämiga till Vita kolonier. Mögel kommer att växa som filamentösa kolonier av olika färger.

typisk kolonimorfologi hos vissa svampar

räkna antalet kolonier och överväga utspädningsfaktorn (om testprovet späddes) vid bestämning av jäst-och/eller mögelantal per gram eller milliliter material.